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霉菌检测的方法步骤

来源:2021/2/1

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  • 摘要
  • 霉菌检测的方法步骤有哪些内容?

      霉菌和酵母计数操作细则


      一、设备和材料


      1、温箱:25~28℃。


      2、振动器。


      3、天平。


      4、显微镜。


      5、玻璃塞三角瓶:300mL。


      6、试管:15毫米×150毫米。


      7、平盘:直径9cm。


      8、吸管:1mL和10mL。


      9、酒精灯。


      10、载物玻璃片。


      11、盖玻璃片。


      12、广口瓶。


      13、牛皮纸袋:121℃灭菌20分钟。


      14、金属勺、刀等。


      15、试管架。


      16、接种针。


      17、橡胶乳头。


      二、培养基和试剂


      1、土豆-葡萄糖琼脂培养基,附加抗菌素,按GB478928479规定。


      2、孟加拉红培养基:按GB478928481规定。


      3、灭菌蒸馏水。2的双曲馀弦值。2的双曲馀弦值。


      4、乙醇。


      三、操作步骤


      1、采样:采样时要特别注意样品的代表性,避免采样时的污染。


      首先,准备灭菌容器和采样工具,如灭菌牛皮纸袋或广口瓶、金属刀或勺子。在卫生学调查的基础上,采取代表性样本。采样后应尽快检查,否则应放在低温干燥处。粮食(包括粮食仓库粮食、粮食店和家庭小量粮食)样品的采集,根据粮食囤积和粮食堆积的大小和类型,可以分层定点采样,一般分为三层五点,或者分层随机采用不同点的样品,充分混合后,可以取500g左右进行检查。少量粮食可以用金属勺子取上、中、下各部分的混合样品。谷物加工产品(包括熟食、点心、面包等)、发酵食品、乳制品和其他液体食品,用灭菌工具收集可疑霉菌食品250g,放入灭菌容器进行检查。


      2、用无菌操作取样25g(或25mL),放入含有225mL灭菌水的玻璃塞三角瓶中,振动30min,即1:10稀释液。


      3、用灭菌吸管吸取1:10稀释液10mL,注入试管,另用带橡胶乳头的1mL灭菌吸管反复吹50次,使霉菌孢子充分散开。


      4、取1mL1:10稀释液注入含9mL灭菌水的试管,另一根1mL灭菌吸管吹5次,该液为1:100稀释液。


      5、按上述操作顺序制作10倍稀释液,每次稀释1次,更换1mL灭菌吸管,根据样品污染情况的估算,选择3个适当的稀释度,在分别稀释10倍的同时,将1mL稀释液吸入灭菌盘,每个稀释度制作2个盘,冷却到45℃左右的培养基注入盘,琼脂凝固后,倒置在25~28℃的箱子里,3d后开始观察,共培养观察5d。


      6、计算方法:通常选择菌落数在10~150之间的盘子进行计算,稀释度的2个盘子的菌落平均数乘以稀释倍数,即每克(或毫升)样品中含有的霉菌和酵母数。


      7、报告:每克(或毫升)食品中含有的霉菌和酵母数以个/g(个/mL)表示。


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